Как да си направим картофена декстроза агар
Неща, от които ще се нуждаете
300 гр. Обелени, нарязани на кубчета картофи
тенджера
Кухненска цедка или тензух
pH тест хартия или pH метър
1 моларна солна киселина
1 моларен натриев хидроксид
4 стъклени колби Ehrlenmayer от 500 ml (или други контейнери с автоклавиране с тесен рот)
10 g декстроза (глюкоза) на прах
20 g агар
Алуминиево фолио
Тенджера под налягане
Стерилни петри
Бакшиш
Повечето гъби се справят добре при слабо киселинни условия, така че крайното рН трябва да бъде между 6 и 6,5, въпреки че може да се регулира към каквото и pH да е необходимо за конкретен вид. Дръжте капаците на петри отворени достатъчно далеч, за да може да се налива среда и да се покрие възможно най-бързо. Необходима е известна практика, за да се постигне бързина и ефективност при изливането на агар в петри. След охлаждане и втвърдяване, PDA плочите могат да бъдат увити в пластмаса и да се съхраняват в хладилник в продължение на месеци. Повечето чешмяна вода съдържа минерали, полезни за растежа на гъбичките; ако обаче местната вода има екстремни минерални концентрации или има много високо или ниско pH, заменете дестилирана вода.
Внимание
Следвайте всички инструкции за експлоатация и безопасност за използвания модел тенджера под налягане. Оставете капаците на колбата да бъдат разхлабени при стерилизация в тенджерата под налягане, за да се избегне свръхналягане. Използвайте термоустойчиви ръкавици, когато боравите с контейнери с гореща среда. Носете предпазни очила, когато работите с тенджерата под налягане, изваждайте стерилизиран PDA и по време на изливане.
Кредит за изображение: Zedcor изцяло притежавани / PhotoObjects.net / Getty Images
Картофеният декстрозен агар (PDA) е добра полутвърда среда с общо предназначение, използвана за култивиране на гъбички. Често се използва за изолиране, отглеждане и поддържане на гъбообразуващи видове. Могат да бъдат закупени готови петри или епруветки, съдържащи PDA, или PDA могат бързо да бъдат направени с помощта на търговски премикс. Въпреки това, не е трудно да се направи проста и ефективна версия от нулата с малка цена.
Приготвяне на картофен екстракт
Етап 1
Поставете картофите в тенджера с приблизително 1,2 литра чешмяна вода и варете на печка за 1 час.
Стъпка 2
Извадете тенджерата от котлона и оставете течността да се охлади, докато може да се управлява удобно (около 10 минути).
Стъпка 3
Изсипете течен картофен екстракт през цедка или тензух и го съберете в друг съд.
Подготовка на медиума
Етап 1
Добавете декстроза и агар към 1 литър вода с екстракт от картофи.
Стъпка 2
Изпробвайте pH на разтвора с тестова хартия за pH или с pH метър.
Стъпка 3
Ако рН е над 6,5, коригирайте го, като добавите една капка разтвор на солна киселина наведнъж и повторно изпробвате.
Стъпка 4
Ако рН е под 6, коригирайте го, като добавите една капка разтвор на натриев хидроксид наведнъж и повторно изпробвате.
стерилизиране
Етап 1
Разбъркайте внимателно средата и я разделете на по-малки партиди от 250 ml, изляти в четирите колби от 500 ml (Забележка: всяка колба трябва да бъде не по-голяма от половината, за да избегнете кипене).
Стъпка 2
Покрийте всяка колба с парче хлабаво алуминиево фолио, така че фолиото да не падне, но не прави плътно уплътнение.
Стъпка 3
Поставете колбите в тенджера под налягане.
Стъпка 4
Работете с тенджерата под налягане в съответствие с инструкциите на производителя, за да стерилизирате PDA при 121 градуса C (250 градуса F) при налягане от 103 211 Pascals (15 PSI) в продължение на 15 минути.
Стъпка 5
Изключете тенджерата под налягане и я оставете да се върне към атмосферното налягане, след това извадете колбите и ги оставете да изстинат, докато могат да се справят.
Изсипване на средата
Етап 1
Подредете стерилните петри на равна повърхност.
Стъпка 2
След като колбите се охладят до температура на обработка, но преди средата да започне да се втвърдява, хванете колбата с една ръка и извадете и отменете капака на фолиото с другата ръка.
Стъпка 3
За всяко петри, повдигнете капака с една ръка, бързо напълнете наполовина с течен PDA и сменете капака.
Стъпка 4
Повторете стъпка 3 по-горе, докато не се напълнят всички петри.
Стъпка 5
Ако има останало PDA, възстановете хлабаво колбата с оригиналния си капак, оставете я да се охлади и втвърди, затегнете капака на фолиото и съхранявайте в хладилник.