Πώς να φτιάξετε πατάτα δεξτρόζη αγάρ
Πράγματα που θα χρειαστείτε
300 γραμμάρια αποφλοιωμένες, ψιλοκομμένες πατάτες
Κατσαρολάκι
Σουρωτήρι κουζίνας ή σεντόνι
Χαρτί δοκιμής pH ή μετρητής pH
1 γραμμομοριακό υδροχλωρικό οξύ
1 μοριακό υδροξείδιο του νατρίου
4 γυάλινες φιάλες Ehrlenmayer 500 mL (ή άλλα στενά στόματα δοχεία με αυτόκλειστο)
10 g σκόνης δεξτρόζης (γλυκόζης)
20 g άγαρ
Αλουμινόχαρτο
Χύτρα ταχύτητος
Αποστειρωμένα τρυβλία Petri
Υπόδειξη
Οι περισσότεροι μύκητες λειτουργούν καλά σε ελαφρώς όξινες συνθήκες, οπότε το τελικό pH πρέπει να είναι μεταξύ 6 και 6,5, αν και μπορεί να προσαρμοστεί σε όποιο pH απαιτείται για ένα συγκεκριμένο είδος. Κρατήστε τα καπάκια τρυβλίων Petri ανοιχτά αρκετά μακριά για να αφήσετε το μέσο να χυθεί και να καλυφθεί το συντομότερο δυνατό. Χρειάζεται κάποια πρακτική για να αποκτήσετε ταχύτητα και αποτελεσματικότητα στο να ρίχνετε άγαρ σε τρυβλία Petri. Μετά από ψύξη και στερεοποίηση, οι πλάκες PDA μπορούν να τυλιχτούν σε πλαστικό και να αποθηκευτούν σε ψυγείο για μήνες. Τα περισσότερα νερά της βρύσης περιέχουν μέταλλα ευεργετικά για την ανάπτυξη των μυκήτων. Ωστόσο, εάν το τοπικό νερό έχει ακραίες συγκεντρώσεις ορυκτών ή έχει πολύ υψηλό ή χαμηλό pH, αντικαταστήστε το αποσταγμένο νερό.
Προειδοποίηση
Ακολουθήστε όλες τις οδηγίες λειτουργίας και ασφάλειας για το μοντέλο της κουζίνας πίεσης που χρησιμοποιείται. Αφήστε τα καπάκια της φιάλης χαλαρά κατά την αποστείρωση στην κουζίνα πίεσης για να αποφύγετε την υπερπίεση. Χρησιμοποιείτε γάντια ανθεκτικά στη θερμότητα όταν χειρίζεστε δοχεία θερμών μέσων. Φοράτε γυαλιά ασφαλείας κατά τη λειτουργία της κουζίνας πίεσης, αφαιρώντας αποστειρωμένο PDA και κατά τη διάρκεια της έκχυσης.
Πιστωτική εικόνα: Zedcor που ανήκει εξ ολοκλήρου / PhotoObjects.net / Getty Images
Το άγαρ δεξτρόζης πατάτας (PDA) είναι ένα καλό ημιστερεό μέσο γενικής χρήσης που χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια μυκήτων. Χρησιμοποιείται συχνά για την απομόνωση, την ανάπτυξη και τη διατήρηση ειδών που σχηματίζουν μανιτάρια. Μπορείτε να αγοράσετε έτοιμα τρυβλία Petri ή δοκιμαστικούς σωλήνες που περιέχουν PDA ή το PDA μπορεί να παρασκευαστεί γρήγορα χρησιμοποιώντας ένα εμπορικό προμίγμα. Ωστόσο, δεν είναι δύσκολο να φτιάξετε μια απλή και αποτελεσματική έκδοση από το μηδέν με μικρό κόστος.
Προετοιμασία εκχυλίσματος πατάτας
Βήμα 1
Τοποθετήστε τις πατάτες σε μια κατσαρόλα με περίπου 1,2 λίτρα νερό βρύσης και βράστε σε μια σόμπα για 1 ώρα.
Βήμα 2
Αφαιρέστε την κατσαρόλα από τη φωτιά και αφήστε το υγρό να κρυώσει μέχρι να μπορεί να χειριστεί άνετα (περίπου 10 λεπτά).
Βήμα 3
Ρίξτε υγρό εκχύλισμα πατάτας μέσω ενός σουρωτήρι ή ενός τυροκομείου και συλλέξτε το σε άλλο δοχείο.
Προετοιμασία του μέσου
Βήμα 1
Προσθέστε δεξτρόζη και άγαρ σε 1 λίτρο νερού εκχυλίσματος πατάτας.
Βήμα 2
Ελέγξτε το pH του διαλύματος με χαρτί δοκιμής pH ή μετρητή pH.
Βήμα 3
Εάν το pH είναι πάνω από 6,5, ρυθμίστε το κάτω προσθέτοντας μία σταγόνα διαλύματος υδροχλωρικού οξέος κάθε φορά και δοκιμάστε ξανά.
Βήμα 4
Εάν το pH είναι χαμηλότερο από 6, προσαρμόστε το προσθέτοντας μία σταγόνα διαλύματος υδροξειδίου του νατρίου κάθε φορά και δοκιμάστε ξανά.
Αποστείρωση
Βήμα 1
Ανακατέψτε καλά το μέσο και διαιρέστε το σε μικρότερες παρτίδες των 250 mL που χύνονται στις τέσσερις φιάλες των 500 mL (Σημείωση: κάθε φιάλη δεν πρέπει να είναι περισσότερο από μισή γεμάτη για να αποφευχθεί το βράσιμο).
Βήμα 2
Καλύψτε κάθε φιάλη με ένα κομμάτι χαλαρά πτυχωτό αλουμινόχαρτο, ώστε το φύλλο να μην πέσει, αλλά να μην σφραγιστεί.
Βήμα 3
Τοποθετήστε τις φιάλες σε χύτρα πίεσης.
Βήμα 4
Λειτουργήστε την κουζίνα πίεσης σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή για να αποστειρώσετε το PDA στους 121 βαθμούς C (250 βαθμούς F) σε πίεση 103.421 Pascals (15 PSI) για 15 λεπτά.
Βήμα 5
Σβήστε την κουζίνα πίεσης και αφήστε την να επιστρέψει στην ατμοσφαιρική πίεση, στη συνέχεια αφαιρέστε τις φιάλες και αφήστε τις να κρυώσουν μέχρι να μπορέσουν να τις χειριστείτε.
Ρίχνει το μέσο
Βήμα 1
Ευθυγραμμίστε τα αποστειρωμένα τρυβλία Petri σε μια επίπεδη επιφάνεια.
Βήμα 2
Μόλις οι φιάλες κρυώσουν στη θερμοκρασία χειρισμού, αλλά προτού αρχίσει να στερεοποιείται το μέσο, πιάστε μια φιάλη με το ένα χέρι και αφαιρέστε και αφήστε το φύλλο αλουμινίου με το άλλο χέρι.
Βήμα 3
Για κάθε τρυβλίο Petri, σηκώστε το καπάκι με το ένα χέρι, γεμίστε γρήγορα στη μέση με υγρό PDA και αντικαταστήστε το καπάκι.
Βήμα 4
Επαναλάβετε το Βήμα 3 παραπάνω έως ότου γεμίσουν όλα τα τρυβλία Petri.
Βήμα 5
Εάν έχει απομείνει PDA, ανακτήστε χαλαρά τη φιάλη με το αρχικό του καπάκι, αφήστε την να κρυώσει και στερεοποιήστε, σφίξτε το καπάκι και φυλάξτε το σε ψυγείο.