Sulge
Menüü

Kuidas teha kartulidekstroosi agarit

Asjad, mida vajate

  • 300 g kooritud, tükeldatud kartulit

  • Kastmega

  • Köögisõel või juustukook

  • pH-testpaber või pH-meeter

  • 1 mol soolhapet

  • 1 mol naatriumhüdroksiidi

  • 4 500-ml klaasist Ehrlenmayeri kolbi (või muid kitsas suuga autoklaavitavaid konteinereid)

  • 10 g dekstroosi (glükoos) pulbrit

  • 20 g agarit

  • Alumiiniumfoolium

  • Kiirkeedupott

  • Steriilsed Petri road

Näpunäide

Enamik seeni saab hästi hakkama kergelt happelistes tingimustes, nii et lõplik pH peaks olema vahemikus 6–6,5, ehkki seda saab reguleerida konkreetse liigi jaoks vajalikule pH tasemele. Hoidke Petri tassi kaaned lahti ainult piisavalt kaugel, et sööde saaks sisse valada ja võimalikult kiiresti katta. Kuid agari petri tasside valamisel on vaja kiirust ja tõhusust. Pärast jahutamist ja tahkumist võib PDA-plaadid mähkida plastikusse ja säilitada kuude kaupa külmkapis. Enamik kraanivett sisaldab seente kasvu jaoks kasulikke mineraale; kui aga kohalikus vees on äärmine mineraalainete kontsentratsioon või selle pH on väga kõrge või madal, asendage destilleeritud vesi.

Hoiatus

Järgige kõiki kasutatava õhupliidi mudeli töö- ja ohutusjuhiseid. Ülerõhu vältimiseks jätke kolbikaaned steriliseerimisel keeduklaasi lahti. Kuuma meediumimahutite käsitsemisel kasutage kuumakindlaid kindaid. Survepliidi kasutamisel, steriliseeritud PDA eemaldamisel ja valamise ajal kandke kaitseprille.

23531023

Kujutise krediit: Zedcor kuulub täielikult / PhotoObjects.net / Getty Images

Kartulidekstroosiagar (PDA) on hea üldotstarbeline pooltahke sööde, mida kasutatakse seente kasvatamiseks. Sageli kasutatakse seda seeni moodustavate liikide isoleerimiseks, kasvatamiseks ja hooldamiseks. PDA-d sisaldavaid valmis Petri tasse või katseklaase saab osta või PDA-sid saab kiiresti valmistada kaubandusliku eelsegu abil. Kuid lihtsate ja tõhusate versioonide loomine nullist väikeste kuludega pole keeruline.

Kartuliekstrakti ettevalmistamine

Samm 1

Pange kartulid umbes 1,2 liitri kraaniveega kastrulisse ja keetke 1 tund pliidil.

2. samm

Eemaldage kastrul tulelt ja laske vedelal jahtuda, kuni seda saab mugavalt käsitseda (umbes 10 minutit).

3. samm

Valage vedel kartuliekstrakt läbi tüve või marli ja koguge see teise mahutisse.

Söötme ettevalmistamine

Samm 1

Lisage dekstroos ja agar 1 liitrile kartuliekstrakti veele.

2. samm

Kontrollige lahuse pH-d pH-testipaberi või pH-meetriga.

3. samm

Kui pH on üle 6,5, reguleerige seda alla, lisades ühe tilga vesinikkloriidhappe lahust korraga ja uuesti testides.

4. samm

Kui pH on alla 6, reguleerige seda, lisades ühe tilga naatriumhüdroksiidi lahust korraga ja testides uuesti.

Steriliseerimine

Samm 1

Segage sööde põhjalikult ja jagage see väiksemateks, 250 ml suurusteks osadeks, mis valatakse nelja 500 ml kolbi (märkus: keedemise vältimiseks ei tohi ükski kolb olla üle poole täidetud).

2. samm

Katke iga kolb lõdvalt kroovitud alumiiniumfooliumitükiga, nii et foolium ei kukuks maha, vaid ei tee tihedat tihendit.

3. samm

Kolvid pannakse keeduklaasi.

4. samm

Pange PDA steriliseerimiseks 15 minutit temperatuuril 121 kraadi C (250 kraadi F) rõhul 103 421 paskaali (15 PSI) ja töötage rõhu all.

5. samm

Lülitage keeduplaat välja ja laske sellel atmosfäärirõhuni tagasi jõuda, eemaldage kolvid ja laske neil jahtuda, kuni neid saab käsitseda.

Keskmise valamine

Samm 1

Joondage steriilsed Petri tassid tasasele pinnale.

2. samm

Kui kolvid on jahtunud temperatuurini, kuid enne, kui keskkond hakkab tahkuma, haarake kolbist ühe käega, eemaldage ja teise käega asetage fooliumkaas kõrvale.

3. samm

Tõstke iga Petri tassi ühe käega kaas, täitke kiiresti pooleldi vedela PDA-ga ja asetage kaas tagasi.

4. samm

Korrake ülaltoodud 3. sammu, kuni kõik petriood on täidetud.

5. samm

Kui PDA-d on järele jäänud, tõmmake kolb lõdvalt algsest fooliumikaanega kokku, laske sellel jahtuda ja tahkuda, keerake fooliumkaas kinni ja hoidke külmkapis.