Kā pagatavot kartupeļu dekstrozes agaru
Lietas, kas jums būs vajadzīgas
300 g nomizotu, sasmalcinātu kartupeļu
Saucepan
Virtuves sietiņš vai siers
pH testa papīrs vai pH metrs
1 molārā sālsskābe
1 molārs nātrija hidroksīds
4 500 ml stikla Ehrlenmayer kolbas (vai citi šauru maļu autoklavējami trauki)
10 g dekstrozes (glikozes) pulvera
20 g agara
Alumīnija folijs
Spiediena katls
Sterili Petri ēdieni
Padoms
Lielākajai daļai sēnīšu labi veicas nedaudz skābos apstākļos, tāpēc galīgajam pH vajadzētu būt no 6 līdz 6,5, lai gan to var pielāgot jebkuram pH, kas nepieciešams konkrētai sugai. Turiet Petri trauciņu vākus atvērtus tik tālu, lai barības vielu varētu ieliet un pēc iespējas ātrāk pārklātu. Lai iegūtu ātrumu un efektivitāti, ielejiet agaru Petri traukos, ir nepieciešama zināma prakse. Pēc atdzesēšanas un sacietēšanas PDA plāksnes var ietīt plastmasā un vairākus mēnešus uzglabāt ledusskapī. Lielākajā daļā krāna ūdens ir minerāli, kas labvēlīgi ietekmē sēnīšu augšanu; tomēr, ja vietējā ūdenī ir izteikta minerālu koncentrācija vai tā pH ir ļoti augsts vai zems, aizstājiet destilētu ūdeni.
Brīdinājums
Izpildiet visus ekspluatācijas un drošības norādījumus par izmantotā spiediena katla modeli. Sterilizējot spiediena katlā, kolbas vākus atstājiet brīvus, lai izvairītos no pārspiediena. Rīkojoties ar karsto materiālu tvertnēm, izmantojiet karstumizturīgus cimdus. Darbinot spiediena plīti, noņemot sterilizēto PDA un ielejot, nēsājiet aizsargbrilles.
Attēla kredīts: Zedcor pilnībā pieder / PhotoObjects.net / Getty Images
Kartupeļu dekstrozes agars (PDA) ir laba vispārējas nozīmes pusšķidra barotne, ko izmanto sēņu kultivēšanai. To bieži izmanto sēņu veidojošo sugu izolēšanai, audzēšanai un uzturēšanai. Var iegādāties gatavus Petri traukus vai mēģenes, kas satur PDA, vai arī PDA var ātri pagatavot, izmantojot komerciālu premiksu. Tomēr nav grūti no nulles izgatavot vienkāršu un efektīvu versiju ar nelielām izmaksām.
Kartupeļu ekstrakta sagatavošana
1. solis
Ievietojiet kartupeļus katliņā ar apmēram 1,2 litriem krāna ūdens un vāriet uz plīts 1 stundu.
2. solis
Katliņu noņem no uguns un ļauj šķidrumam atdzist, līdz ar to var ērti rīkoties (apmēram 10 minūtes).
3. solis
Ieliet šķidru kartupeļu ekstraktu caur sietiņu vai marli un savāc to citā traukā.
Sagatavošana videi
1. solis
Pievienojiet dekstrozi un agaru 1 litram kartupeļu ekstrakta ūdens.
2. solis
Pārbaudi šķīduma pH ar pH testa papīru vai pH metru.
3. solis
Ja pH ir virs 6,5, noregulējiet to, pievienojot pa vienam pilienam sālsskābes šķīduma un veicot atkārtotu pārbaudi.
4. solis
Ja pH ir mazāks par 6, to noregulē, pievienojot pa vienam pilienam nātrija hidroksīda šķīduma un atkārtoti pārbaudot.
Sterilizācija
1. solis
Rūpīgi samaisiet barotni un sadaliet to mazākās 250 ml partijās, kuras ielej četrās 500 ml kolbās (piezīme: katrai kolbai jābūt ne vairāk kā pusei pilnas, lai izvairītos no vārīšanās).
2. solis
Katru kolbu pārklāj ar viegli salocītas alumīnija folijas gabalu, lai folija nenokristu, bet neveidotu cieši noslēgtu.
3. solis
Kolbas ievieto spiediena katlā.
4. solis
Darbiniet spiediena vārīšanas katlu saskaņā ar ražotāja instrukcijām, lai 15 minūtes sterilizētu PDA 121 grādu C (250 grādi F) pie 103 421 paskāla (15 PSI) spiediena.
5. solis
Izslēdziet spiediena katlu un ļauj tam atgriezties pie atmosfēras spiediena, pēc tam noņemiet kolbas un ļaujiet tām atdzist, līdz ar tām varēs rīkoties.
Vidēja ieliešana
1. solis
Sterilos Petri traukus novietojiet uz līdzenas virsmas.
2. solis
Kad kolbas ir atdzisušas līdz apstrādes temperatūrai, bet, pirms barotne sāk sacietēt, ar vienu roku satveriet kolbu un ar otru roku noņemiet un atlieciet tās folijas vāku.
3. solis
Katram Petri trauciņam ar vienu roku paceliet vāku, ātri līdz pusei piepildiet ar šķidru PDA un nomainiet vāku.
4. solis
Atkārtojiet 3. darbību iepriekš, līdz visi iepildītie pīrāgi ir piepildīti.
5. solis
Ja palicis PDA, brīvi atgatavojiet kolbu ar tās sākotnējo folijas vāku, ļaujiet tai atdzist un sacietēt, pievelciet folijas vāku un uzglabājiet ledusskapī.